上海恒遠與您分享ELISA試劑盒常見問題
更新時間：2016-05-11 點擊次數(shù)：1884
上海恒遠就簡單整理了5個問題，具體內(nèi)容如下：
一、一個ELISA試劑盒檢測幾個樣品？
小編自己在各大論壇看到zui多的三個答案：
1）48T 可做42個樣本加6個標(biāo)準(zhǔn)曲線；96T 可做90個樣本加6個標(biāo)準(zhǔn)曲線
2）以96T試劑盒來算，定量的試劑盒一般可以做90個左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個左右的樣品
3）96T的ELISA試劑盒，去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測，zui多還能檢測80個標(biāo)本；48T的zui多30個樣本。
二、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品？板能重復(fù)利用嗎？
96T，一般做復(fù)孔的話，做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要16個孔，剩下80個孔就可以做40個樣本。這個板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。
三、ELISA試劑盒想請教一下，我想用elisa法測血清里的一種抗原，查了資料，發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用，現(xiàn)在就有2種備選方案，一種是買抗體對自己包被（查了R&D等大公司都沒有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會不會比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢？
如果你覺得技術(shù)不錯又對其他公司不放心，可以自己購買抗體對自己包被，這個就是麻煩點，自己包被用著放心，舒心；
另外國內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯的公司，如北京達科為，上海巧伊，依科賽，深圳欣博盛等等
四、western 和ELISA 處理樣本有何差別？
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。ELISA試劑盒建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復(fù)凍融。
ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復(fù)孔，每個樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時要大于200ul每支），直接實驗。多余的-80保存，一樣避免反復(fù)凍融。
不過ELISA少量樣品進行預(yù)實驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準(zhǔn)，或者濃度過低，小于試劑盒zui低可測濃度。
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