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            標(biāo)準(zhǔn)曲線圖該怎樣選擇方程去擬合
            更新時(shí)間:2015-08-19 點(diǎn)擊次數(shù):2754

            ELISA 試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制選擇什么方程去擬合?做校準(zhǔn)曲線時(shí),曲線擬合類型是選擇線性還是二次方程(曲線),二者哪一個(gè)更?這兩個(gè)問題幾乎是剛開始接觸所有做ELISA實(shí)驗(yàn)的新手必問的問題。因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。恒遠(yuǎn)技術(shù)為您總結(jié)以下要點(diǎn):
            在S曲線的低濃度部門可以用乘冪方程很好的擬合,中低濃度部門可以用直線方程,中間部門可用對(duì)數(shù)方程,而中后段可用四參數(shù)。免疫檢測(cè)時(shí)尺度點(diǎn)(可以是倍比稀釋的,也可以不是)濃度假如和相應(yīng)的吸光度(OD)值假如能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系當(dāng)然是的了,這時(shí)可以通過EXELL等利便的獲得擬合曲線,進(jìn)而推算出樣品的濃度值。
            關(guān)于尺度曲線的擬合方式,直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對(duì)數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線擬合,但都只合用于曲線的一部門,有的合用于前半段,有的合用于后半段,有的合用于中間一段,而Logistic曲線則對(duì)曲線的全部都有較好的合用性。在一個(gè)長(zhǎng)的區(qū)間內(nèi),Logistic應(yīng)該都能擬合得較為理想。假如用來定量,S形曲線的中間段(較陡處)是比較好的,而兩真?zhèn)€平坦部門計(jì)算誤差會(huì)大,有時(shí)甚至?xí)艽蟆S糜诿庖邫z測(cè)的所謂“尺度曲線"實(shí)在稱為擬合曲線比較合適。目前上zui流行的免疫檢測(cè)擬合方式是“四參數(shù)邏輯擬合",用這種擬合方式往往能夠比較的反映濃度和吸光度的曲線關(guān)系,從而進(jìn)一步比較準(zhǔn)確的獲得樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度值。但我們做免疫檢測(cè)很少有時(shí)候能夠有這么理想的情況,標(biāo)品濃度和相應(yīng)OD值往往是"S"型的曲線關(guān)系,這時(shí)就不能用直線擬合的方式了,而對(duì)擬合方法進(jìn)行選擇就是必要的了。樞紐在于你的尺度曲線做到了S形的哪一部門,你想檢測(cè)的樣品濃度在曲線的哪一部門。人ELISA試劑盒當(dāng)然,假如用于定量,仍是在中間一段較好。但建模型是一回事,而用它來定量是另一回事。這些方法固然沒有一種方法可以通用,但也都可以用。但并不是說它就是的。事實(shí)上不僅是ELISA,其它良多生物學(xué)反應(yīng)都是S形曲線,也都可以用Logistic曲線擬合。

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