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            ELISA試劑盒測定影響因素之一操作因素
            更新時間:2015-08-12 點擊次數(shù):1263

             ELISA方法被廣泛用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗中如果處理不當,會出現(xiàn)一些錯誤結(jié)果。引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:(1)標本因素;(2)操作因素;(3)試劑因素;上海恒遠就操作因素對ELISA測定的影響做如下討論:

             操作因素

            1  溫育的影響

            溫育是影響ELISA測定結(jié)果的關(guān)鍵因素。溫育時間不夠,弱陽性標本檢測不出;溫育溫度不夠,弱陽性標本也難以檢出。

            2  洗板的影響 

            洗板對ELISA測定來說也是關(guān)鍵步驟。洗板分手工洗板和機器洗板,一般認為機器洗板較手工洗板效果要好,關(guān)鍵是洗板次數(shù)的選擇。洗板次數(shù)較少,造成殘留,可引起假陽性結(jié)果;洗板次數(shù)過多,可造成抗原抗體結(jié)合物洗脫,造成假陰性結(jié)果。

            3  顯色的影響 

            影響顯色的關(guān)鍵是顯色溫度和顯色時間,有些實驗室操作人員不嚴格按說明書操作,因為擔心“花板",往往是顯色時間不到就匆忙終止顯色,結(jié)果造成弱陽性標本不能顯色而導(dǎo)致假陰性發(fā)生。

            4  加樣的影響 

            加入樣品、試劑及混勻時間的差異稱為操作時差。操作時差在每個試驗中都存在,尤為手工操作更著,對結(jié)果都會產(chǎn)生或大或小的影響。ELISA常用項目,例如:乙肝兩對半,多是成批檢測。從加*個樣本到zui后一個樣本,包括中間換吸管尖的工作,在這一過程中有一個時間差;加試劑及混勻也同樣存在時間差,這種操作時間差會致使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間的不一致,而這種不一致可以直接導(dǎo)致誤差的產(chǎn)生,尤其是在夏天,若不合理安排時間、盡量減少時差,將會導(dǎo)致假陽性或假陰性的結(jié)果出現(xiàn)。

            以上是操作因素對ELISA檢測的影響,更多信息可通過掃描下方二維碼或搜索公眾號hyelisakit關(guān)注上海恒遠進行了解!

                               

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