鞭毛染色液實(shí)驗(yàn)過程中遇到的問題及方法
更新時(shí)間：2013-08-08 點(diǎn)擊次數(shù)：1562
玻片處理：將玻片用洗衣粉煮沸10分鐘，水洗，再用清潔液浸泡，加溫10分鐘，水洗，再放入95%酒精脫脂，同時(shí)取出涼干，可制成涂片．
染色液的配制：
20%的鞣酸溶液（加溫溶解）2毫升
鉀明礬飽和液2毫升
石碳酸飽和液5毫升
10%堿性復(fù)紅無水乙醇溶液1．5毫升
將上述各液混合后放置2-3日，過濾后備用，此液使用不得超大型過5周．
染色步驟：將細(xì)菌接種在瓊脂平板上，培養(yǎng)8-18小時(shí)，（35-37℃），用無水乙醇浸泡過的而且干燥的新玻片加一滴無菌DW，用接種環(huán)挑取菌落，置DW液面上，然后自然干燥．滴加染色液染1-2分鐘，水洗干后鏡檢．
結(jié)果：鞭毛染成紅色．
在實(shí)際鞭毛染色液膠體金實(shí)驗(yàn)中遇到的問題及回答：
1）超過了判讀時(shí)間結(jié)果還準(zhǔn)確嗎？
答:結(jié)果不準(zhǔn)確，應(yīng)按照說明書規(guī)定的時(shí)間判讀。如果到判讀時(shí)間為止，結(jié)果為陰性，判讀時(shí)間以后，出現(xiàn)淡淡的線條，可能是有色標(biāo)記物持續(xù)釋放造成的，但是這種結(jié)果是無效的。
2）使用冰箱保存的標(biāo)本和產(chǎn)品，應(yīng)該注意什么？
答：若標(biāo)本、試劑、緩沖液冷藏后，檢測(cè)前應(yīng)把冷藏過包裝完好的檢測(cè)試劑、緩沖液放置空氣中復(fù)溫，冷藏或冷凍的標(biāo)本檢測(cè)前也應(yīng)復(fù)溫。如果沒有與室溫平衡即開始檢測(cè)，空氣中的水分遇冷凝集在沒有復(fù)溫的試劑上，導(dǎo)致產(chǎn)品受潮，可能影響測(cè)試結(jié)果。如果冰箱濕度較高，不建議開封過的筒裝產(chǎn)品在冰箱內(nèi)保存。
3）樣品移行速度特別慢或無樣本跑動(dòng)現(xiàn)象（在反應(yīng)窗內(nèi)不見有液體在膜上流動(dòng)）
答：加入的標(biāo)本量或全血加稀釋液的量不夠：重新試驗(yàn)。
包裝袋破損或試劑失效：重新試驗(yàn)。
從冷環(huán)境取出后沒復(fù)溫：重新試驗(yàn)。
診斷試劑裝配不當(dāng)：與供應(yīng)商。
4）在反應(yīng)窗內(nèi)見到紅色豎線
答：當(dāng)樣本在膜上流動(dòng)時(shí)可能發(fā)生：該情況不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果，但保證背景清晰的情況下在規(guī)定時(shí)間內(nèi)讀取結(jié)果。
可能使用了已溶血樣本：用新鮮標(biāo)本重新測(cè)試。
5）規(guī)定的結(jié)果讀取時(shí)間時(shí)未見 C線？
答：加入的樣本量不夠：重新測(cè)試，按說明書要求加入足夠的樣本量。
加入的樣本量太多，導(dǎo)致產(chǎn)品流動(dòng)不正常：按照說明書要求滴加樣本量。
樣本不流動(dòng)，試劑有問題：與供貨商。
用血清血漿試劑檢測(cè)全血：用對(duì)應(yīng)的標(biāo)本檢測(cè)。
6）檢測(cè)后出現(xiàn)假陽性結(jié)果
答:血清/血漿樣本中含有特殊干擾物質(zhì)：用另外的方法確診檢測(cè)結(jié)果。
在超過規(guī)定時(shí)間后讀取結(jié)果：不要在說明書規(guī)定讀數(shù)時(shí)間后讀取檢測(cè)結(jié)果。
7）檢測(cè)后出現(xiàn)假陰性結(jié)果
答：樣本中被檢樣本濃度低于檢測(cè)閾值：用其它檢測(cè)方法確認(rèn)。
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