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            人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒操作步驟
            更新時(shí)間:2011-03-16 點(diǎn)擊次數(shù):1930

                             人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒操作步驟

            1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

            480pg/ml
            5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
            150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            240pg/ml
            4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
            150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            120pg/ml
            3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
            150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            60pg/ml
            2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
            150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            30pg/ml
            1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
            150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

                                                             
             
            2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
            3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
            4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
            5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
            6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
            7.         溫育:操作同3。
            8.         洗滌:操作同5。
            9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
            10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
            11.     測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
            1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
            2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
            上海恒遠(yuǎn)生物長(zhǎng)期專業(yè)代理美國(guó)進(jìn)口分裝、原裝ELISA“人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒”,現(xiàn)貨供應(yīng),*,質(zhì)量保證。中英文雙版說(shuō)明書,提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)。需要產(chǎn)品以及其它詳細(xì)信息請(qǐng)直接與我們,一個(gè)工作日之內(nèi)給予答復(fù)。

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