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            elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)異常,您可曾想過是什么原因?
            更新時(shí)間:2016-11-01 點(diǎn)擊次數(shù):1300

               在使用elisa試劑盒做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,有些細(xì)節(jié)若是做不好會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)異常,或者效果不佳,那么您可曾想過是什么原因嗎?接下來上海恒遠(yuǎn)帶您了解:

            ●白板異常:顯色步驟結(jié)束后,酶標(biāo)板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。

            這可能是因?yàn)椋?/strong>
            1. 試劑已過效期,或不同試劑盒組分混用(解決方式:檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)未過期以及所有組分均屬對應(yīng)的試劑盒。不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用)。
            2. 錯(cuò)加、漏加試劑底物、顯色劑 A或B(解決方式:嚴(yán)格按說明書的步驟操作,加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現(xiàn)象)。
            3. 洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力(解決方式:確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈)。
            4. 終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜锞彌_液配制(解決方式:每次配制時(shí)都應(yīng)看清標(biāo)簽標(biāo)明物質(zhì))。
            5. 蒸餾水有問題(解決方式:確認(rèn)配制洗液的純化水達(dá)到要求且未污染,與好蒸餾水比較)。
            ●顯色弱、靈敏度低:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,包括陽性對照、質(zhì)控在內(nèi)的所有板孔顏色均較淡。 
            這可能是因?yàn)椋?/strong>試劑盒超過期, 超過有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào);試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行保存,受高溫影響(實(shí)驗(yàn)前檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)試劑未過期。不要將試劑盒長時(shí)間置于常溫下,按使用規(guī)定儲(chǔ)藏)。
            1. 試劑、樣品用前未平衡至室溫。如何解決?從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應(yīng)置室溫平衡 20分鐘左右。
            2. 加入試劑的體積和時(shí)間有誤,移液器計(jì)量不準(zhǔn),吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔。如何解決?確定所使用的試劑體積正確,加入時(shí)間適當(dāng)。 校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應(yīng)*。
            3. 洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力。如何解決?確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈,確認(rèn)配制洗液的純化水達(dá)到要求且未受污染。
            4. 孵育時(shí)間及孵育溫度未達(dá)到要求 ,反應(yīng)板放入培養(yǎng)箱時(shí)注意溫度并及時(shí)調(diào)整。如何解決?孵育溫度應(yīng)控制在 37-38℃,孵育時(shí)間嚴(yán)格按照說明書操作。 保溫期內(nèi)不宜多開門,以免影響保溫。
            5. 洗板次數(shù)過多,或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求;洗滌沖擊力太大。浸泡時(shí)間太長。如何解決?嚴(yán)格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板,減小洗滌沖擊力,按說明書要求置留洗滌液時(shí)間和洗滌次數(shù)。
            6. 顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入。如何解決?顯色劑滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入
            7. 底物作用時(shí)間不夠。如何解決?準(zhǔn)確定時(shí)。
            8. 蒸餾水水質(zhì)有問題。如何解決?測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響。
            ●實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,陰陽性對照正常,質(zhì)控正常,但臨床標(biāo)本感覺顯色較弱 
            1. 待測標(biāo)本中可能不含強(qiáng)陽性標(biāo)本,故結(jié)果可能是正常的(解決方式:如有懷疑,可復(fù)檢)。
            2. 標(biāo)本加入疊氮鈉作為防腐劑(解決方式:酶免實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)本禁用疊氮鈉作為防腐劑,可選用 proclin、硫柳汞等其他防腐劑)。
            ●陰陽性對照正常,但質(zhì)控、參考品或個(gè)別弱陽性標(biāo)本未能檢出。
            1. 未達(dá)要求的孵育溫度及孵育時(shí)間可檢出強(qiáng)陽性標(biāo)本,但質(zhì)控或弱陽性標(biāo)本受 溫度變化影響較大而被未檢出(解決方式:質(zhì)控品或標(biāo)本避免反復(fù)凍融。標(biāo)本在一周內(nèi)使用的,可存于 2-8℃,如需長期保存,應(yīng)置于-20℃以下保存。質(zhì)控品應(yīng)小量分裝,并置于-20℃以下保存)。
            2. 質(zhì)控品或標(biāo)本高溫放置過久,或被反復(fù)凍融致待測物滴度下降,而未能檢出(解決方式:重新設(shè)定酶標(biāo)儀的參數(shù),特別是檢查濾光片是否匹配)。
            3. 儀器設(shè)定不正確,濾光片不匹配(解決方式:重新設(shè)定酶標(biāo)儀的參數(shù),特別是檢查濾光片是否匹配)。

            • 地址:上海市松江區(qū)漕河涇漢橋文化科技園B座

            • 電話:13564766906

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