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技術(shù)文章

Technical articles

2023
5-22

ELISA技術(shù)綜述（三）
以下簡(jiǎn)述固相載體和包被過(guò)程。1.2包被的方式將抗原或抗體固定在過(guò)程稱(chēng)為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用力。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，...
2023
5-15

ELISA技術(shù)綜述（二）
ELISA的商品化試劑盒成分和分類(lèi)：在臨床檢驗(yàn)或者科研檢測(cè)中，ELISA實(shí)驗(yàn)通常有商品試劑盒提供。ELISA試劑盒中有三個(gè)必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；（5）酶聯(lián)物（結(jié)合物）及標(biāo)本的稀釋液；（6）洗滌液；（7）酶反應(yīng)終止液。1、免疫吸附劑已包被抗原...
2023
5-8

ELISA技術(shù)綜述（一）
ELISA原理ELISA利用抗原抗體之間專(zhuān)一性結(jié)合之特性，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)；由于結(jié)合與固體承載物（一般為塑膠孔盤(pán)）上之抗原或抗體仍可具有免疫活性，因此設(shè)計(jì)其結(jié)合機(jī)制後，配合酵素顯色反應(yīng)，即可顯示特定抗原或抗體是否存在，并可利用顯色之深淺進(jìn)行定量分析。根據(jù)待測(cè)樣品與結(jié)合機(jī)制的不同，ELISA可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方式，主要以"三明治法"(sandwich)、"間接法"(indirect)、以及"競(jìng)爭(zhēng)法"(Competitive)三種為主，以下為各種方法之介紹。ELISA分類(lèi)見(jiàn)...
2023
5-4

ELISA試劑盒中的抗體
在ELISA試劑盒中運(yùn)用的抗體可分為多克隆抗體（多抗）和單克隆抗體（單抗）。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清，制備較簡(jiǎn)略，但抗血清成分凌亂，除含針對(duì)抗原（多個(gè)表位）的抗體外，還含有多種其他抗體，親和力和特異性相對(duì)要低于單抗，且制備周期長(zhǎng)，批間差異較大。而單抗僅針對(duì)抗體的單一表位，ELISA試劑盒親和力和特異性均較多抗高，且制備技能老練，產(chǎn)量大，批間差異小，但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其缺陷之地址，在雙抗體夾心法中，如包被和指示抗體運(yùn)用同一單抗，則由于結(jié)合位點(diǎn)的短少，簡(jiǎn)略構(gòu)成假陰．性成果。在...
2023
4-24

植物微囊藻毒素LR(MC-LR)elisa試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T1.2pg/mL-40pg/mL使用目的：本試劑盒用于測(cè)定植物組織，細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中微囊藻毒素LR(MC-LR)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物微囊藻毒素LR(MC-LR)水平。用純化的植物微囊藻毒素LR(MC-LR)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物微囊藻毒素LR(MC-LR)，再與HRP標(biāo)記的微囊藻毒素LR(MC-LR)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)che底洗滌后加底物...
2023
4-19

ELISA中分析非特異性顯色
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)自1971年自問(wèn)世以來(lái)，以其敏感性高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便、安全，而廣泛應(yīng)用于臨床診斷，開(kāi)創(chuàng)了免疫學(xué)診斷的新紀(jì)元。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、生產(chǎn)及使用中常常會(huì)碰到非特異性問(wèn)題。1、試劑盒特異性因素1、1固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板最為常見(jiàn)[1]。它具有良好的吸附性能，孔底透明度高，空白值低，各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別...
2023
4-10

ELISA試劑盒變質(zhì)原因詳解
ELISA試劑盒為什么會(huì)變質(zhì)？是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保？一旦變質(zhì)會(huì)有什么影響呢？一、辦法學(xué)的影響ELISA測(cè)定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法，其間競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時(shí)差所引起的競(jìng)爭(zhēng)等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。二、試劑要素不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量wan全一致，即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)成果也存在差異，因而必須挑選和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑，并保證保存條件...
2023
4-3

人組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)ELSIA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T6pg/ml-220pg/ml使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)水平。用純化的人組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)，再與HRP標(biāo)記的組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)抗體結(jié)合，形成抗體...

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