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            技術(shù)文章

            Technical articles
            • 2023

              5-22

              ELISA技術(shù)綜述(三)

              以下簡(jiǎn)述固相載體和包被過(guò)程。1.2包被的方式將抗原或抗體固定在過(guò)程稱(chēng)為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用力。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,...
            • 2023

              5-15

              ELISA技術(shù)綜述(二)

              ELISA的商品化試劑盒成分和分類(lèi):在臨床檢驗(yàn)或者科研檢測(cè)中,ELISA實(shí)驗(yàn)通常有商品試劑盒提供。ELISA試劑盒中有三個(gè)必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);(5)酶聯(lián)物(結(jié)合物)及標(biāo)本的稀釋液;(6)洗滌液;(7)酶反應(yīng)終止液。1、免疫吸附劑已包被抗原...
            • 2023

              5-8

              ELISA技術(shù)綜述(一)

              ELISA原理ELISA利用抗原抗體之間專(zhuān)一性結(jié)合之特性,對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè);由于結(jié)合與固體承載物(一般為塑膠孔盤(pán))上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設(shè)計(jì)其結(jié)合機(jī)制後,配合酵素顯色反應(yīng),即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用顯色之深淺進(jìn)行定量分析。根據(jù)待測(cè)樣品與結(jié)合機(jī)制的不同,ELISA可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方式,主要以"三明治法"(sandwich)、"間接法"(indirect)、以及"競(jìng)爭(zhēng)法"(Competitive)三種為主,以下為各種方法之介紹。ELISA分類(lèi)見(jiàn)...
            • 2023

              5-4

              ELISA試劑盒中的抗體

              在ELISA試劑盒中運(yùn)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清,制備較簡(jiǎn)略,但抗血清成分凌亂,除含針對(duì)抗原(多個(gè)表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對(duì)要低于單抗,且制備周期長(zhǎng),批間差異較大。而單抗僅針對(duì)抗體的單一表位,ELISA試劑盒親和力和特異性均較多抗高,且制備技能老練,產(chǎn)量大,批間差異小,但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其缺陷之地址,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體運(yùn)用同一單抗,則由于結(jié)合位點(diǎn)的短少,簡(jiǎn)略構(gòu)成假陰.性成果。在...
            • 2023

              4-24

              植物微囊藻毒素LR(MC-LR)elisa試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

              本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T1.2pg/mL-40pg/mL使用目的:本試劑盒用于測(cè)定植物組織,細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中微囊藻毒素LR(MC-LR)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物微囊藻毒素LR(MC-LR)水平。用純化的植物微囊藻毒素LR(MC-LR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入植物微囊藻毒素LR(MC-LR),再與HRP標(biāo)記的微囊藻毒素LR(MC-LR)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)che底洗滌后加底物...
            • 2023

              4-19

              ELISA中分析非特異性顯色

              酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)自1971年自問(wèn)世以來(lái),以其敏感性高,特異性強(qiáng),操作簡(jiǎn)便、安全,而廣泛應(yīng)用于臨床診斷,開(kāi)創(chuàng)了免疫學(xué)診斷的新紀(jì)元。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、生產(chǎn)及使用中常常會(huì)碰到非特異性問(wèn)題。1、試劑盒特異性因素1、1固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板最為常見(jiàn)[1]。它具有良好的吸附性能,孔底透明度高,空白值低,各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別...
            • 2023

              4-10

              ELISA試劑盒變質(zhì)原因詳解

              ELISA試劑盒為什么會(huì)變質(zhì)?是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保?一旦變質(zhì)會(huì)有什么影響呢?一、辦法學(xué)的影響ELISA測(cè)定形式包含以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其間競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時(shí)差所引起的競(jìng)爭(zhēng)等要素的影響,成果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難操控。二、試劑要素不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量wan全一致,即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)成果也存在差異,因而必須挑選和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑,并保證保存條件...
            • 2023

              4-3

              人組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)ELSIA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

              本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T6pg/ml-220pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)水平。用純化的人組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3),再與HRP標(biāo)記的組蛋白H3賴(lài)氨酸27(H3K27me3)抗體結(jié)合,形成抗體...
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